荧光检测器的定量基础及检测原理
2021-12-08
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荧光检测器是高压液相色谱仪常用的一种检测器。用紫外线照射色谱馏分，当试样组分具有荧光性能时，即可检出。
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在光致发光中，发射出的辐射总依赖于所吸收的辐射量。由于一个受激发的分子回到基态时可能以无辐射跃迁的形式产生能量损失，因而发射辐射的光子数通常都少于吸收辐射的光子数，它以量子效率Q来表示。
在固定的实验条件下，量子效率是个常数，通常Q小于1。对可用荧光检测的物质来说，Q值一般在0.1～0.9之间。荧光强度F与吸收光强度成正比。
对于稀溶液，荧光强度与荧光物质溶液浓度、摩尔吸光系数、吸收池厚度、入射光强度、荧光的量子效率及荧光的收集效率等成正相关。在其他因素保持不变的条件下，物质的荧光强度与该物质溶液浓度成正比,这是荧光检测器的定量基础。荧光检测器属于溶质型检测器，可直接用于定量分析。
荧光检测器的检测原理：
化合物受紫外光激发后，发射出比激发光波长更长的光，称为荧光；
荧光强度 (F) 与激发光强度 (I0) 及荧光物质浓度 (C) 之间的关系为：F=2.3QKI0εCl
F=KC
Q为量子产率，K为荧光效率，ε为摩尔吸光系数，l为光径长度。
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